脯氨酸鉴别
(1)取本品与脯氨酸对照品各适量,分别加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液,作为供试品溶液与对照品溶液。照其他氨基酸项下的色谱条件试验,供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。[5]
(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(《药品红外光谱集》1041图)一致。[5]
检查
1酸度
取本品2.0g,加水20ml溶解后,依法测定(2010年版药典二部附录Ⅵ H),pH值应为5.9~6.9。[5]
2溶液的透光率
取本品1.0g,加水10ml溶解后,照紫外-可见分光光度法(2010年版药典二部附录ⅣA),在430nm的波长处测定透光率,不得低于98.0%。[5]
3氯化物
取本品0.25g,依法检查(2010年版药典二部附录ⅧA),与标准氯化钠溶液5.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.02%)。[5]
4硫酸盐
取本品1.0g,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅷ B),与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.02%)。[5]
5铵盐
取本品0.10g,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅷ K),与标准氯化铵溶液2.0ml制成的对照液比较,不得更深(0.02%)。[5]
6其他氨基酸
取本品,加水溶解并稀释制成每1ml中约含50mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取1ml,置200ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液。另取脯氨酸对照品与苏氨酸对照品各适量,置同一量瓶中,加水溶解并稀释制成每1ml中各约含0.4mg的溶液,作为系统适用性试验溶液。照薄层色谱法(2010年版药典二部附录ⅤB)试验,吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-无水乙醇-浓氨溶液-水(8:8:1:3)为展开剂,展开,晾干,喷以茚三酮的丙酮溶液(1→50),在80℃加热至斑点出现,立即检视。对照溶液应显一个清晰的斑点,系统适用性试验溶液应显两个*分离的斑点。供试品溶液如显杂质斑点,其颜色与对照溶液的主斑点比较,不得更深(0.5%)。[5]
7干燥失重
取本品,在105℃干燥3小时,减失重量不得超过0.3%(2010年版药典二部附录Ⅷ L)。[5]
8炽灼残渣
不得超过0.1%(2010年版药典二部附录Ⅷ N)。[5]
9铁盐
取本品1.0g,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅷ G),与标准铁溶液1.0ml制成的对照液比较,不得更深(0.001%)。
10重金属
取本品1.0g,加水23ml溶解后,加醋酸盐缓冲液(pH 3.5)2ml,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅷ H*法),含重金属不得超过百万分之十。
11砷盐
取本品2.0g,加盐酸5ml与水23ml溶解后,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅷ J*法),应符合规定(0.0001%)。
12细菌内毒素
取本品,依法检查(2010年版药典二部附录ⅪE),每1g脯氨酸中含内毒素的量应小于10EU(供注射用)。
脯氨酸含量测定
取本品约0.1g,精密称定,加冰醋酸50ml使溶解,照电位滴定法(2010年版药典二部附录ⅦA),用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于11.51mg的C5H9NO2。
体内代谢
在谷氨酰激酶(γ- GK)的作用下谷氨酸生成谷氨酰磷酸(γ-GP),而后在谷氨酸一半醛脱氢酶(GSADH)的作用下生成谷氨酸一半醛(GSA),GSA自发环化为吡咯琳-5-羧酸(P5C),在吡咯琳-5-羧酸还原酶(P5CR)的作用下还原为脯氨酸。
脯氨酸在植物体内的降解基本上是合成过程的逆过程,这一过程首先发生在线粒体中,脯氨酸在线粒体中由脯氨酸脱氢酶(ProDH)催化,生成P5C,P5C在吡咯琳-5-羧酸脱氢酶(P5CDH)作用下生成谷氨酸,在植物受到渗透胁迫时,氧化降解的过程受到抑制,这样细胞中脯氨酸含量增加,植物复水,此过程又会被诱导,导致脯氨酸含量下降。
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