牛凝-血酶Thrombin
 
简介：凝-血酶（Thrombin）来源于牛血浆，分子量37KD，是由两条肽链（31KD和6KD）通过二硫键组成的。凝-血酶是凝-血酶原（凝-血因子Ⅱ）激活后形成的蛋白质水解酶，其催化纤维蛋白原（fibrinogen）水解掉A肽和B肽，由此形成纤维蛋白单体，单体进一步聚合。
由于凝-血酶具有切割序列专一性强，水解效率高的特点，它被广泛地应用于基因工程产品的开发，其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。

来源：牛血浆
性状：白色或微黄色冻干粉
规格：1000U/支
保存：冻干粉4-8℃保存2年
纯度：SDS-PAGE电泳纯度≥95%（无蛋白酶）
比活：≥2000U/mgpr
使用方法：生理盐水溶解使用，复溶后-20度冻存，避免反复冻融
用途：凝-血酶时间检测试剂（TT）配制、纤维蛋白原检测试剂（FIB）配制、TB位点酶切、纳豆激酶活力测定、尿激-酶活力测定等,非临床治疗使用。

凝-血酶是一种广泛用于切割标签的蛋白酶，能够有效切质量比仅为1:2000的蛋白。建议消化缓冲液:20mMTris-HCl缓冲液，150mM NaCl，pH8.0，于20℃到37℃之间切割0.3到16小时,1U可切割约0.1-0.5mg蛋白。
凝-血酶良好切割位点是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',这里X4和X3是疏水氨基酸而X1'和X2'是非酸性氨基酸，一些经常使用的识别位点L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和M-Y-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之间切割比在4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他识别位点是X2-R[K]-X1',这里X2或者X1'是甘-氨酸，例如A-R-G和G-K-A，这里切割发生在第二个残基后。在凝-血酶切割位点和N末端标签之间插入五个甘-氨酸残基可改善切，通过这一"甘-氨酸连接肽"只需较少酶量就可达到切割,而且也可以避免可能发生的错误切割。凝-血酶可从切割产物中用p-氨基琼脂糖亲和纯化,或者苯甲脒琼脂糖移去。
 
实验室操作注意事项：
1.实验时根据试验的情况和性质进行必要的防护。根据试验可能发生的危险事故佩戴必要的防护工具，例如穿好试验服，戴橡胶手套，防护面具，防毒面具等。实验前，要注意清理试验场周围的安全隐患。检查试验装置、药品和相关物品是否有不符合要求的情况等。
2.遵循化学药品的性质和化学反应的规律，不盲目蛮干和主观臆测化学反应的过程。应根据化学反应的性质和过程选择匹配的反应装置，不可图省事省去必要的安全措施。
3.经常估计到实验的危险性
实验事故虽不可预测，但其危险性的大小是可以估计到的。即使对不大了解的实验，也必须推测其危险程度而制订相应的预防措施。象下面这类实验，必须十分注意。
①不了解的反应及操作;
②存在多种危险性的实验(如发生火灾、毒气等);
③在严酷的反应条件(如高温、高压等)下进行的实验。
4.充分作好发生事故时的预防措施并加以检查。
平时注意熟悉需要关闭的主要龙头、电气开关，灭火器的位置及操作方法，避免发生事故时才四处寻找应急的物品。
5.实验的后处理。实验的后处理工作，亦属实验过程的组成部份。特别不可忽略回收溶剂和废液、废弃物等的处理。

牛凝-血酶Thrombin